产品货号:
BTN111109
中文名称:
DOP-PCR试剂盒
英文名称:
Degenerate Oligonucleotide Primer Kit
产品规格:
50T
发货周期:
1~3天
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DOP-PCR(Degenerate Oligonucleotide Primer PCR,简并寡聚核苷酸引物PCR)是扩增全基因组的方法之一,它利用中间含有6个随机碱基的22nt引物,通过两轮PCR(第一轮低温复性,第二轮高温复性)而将模板DNA扩增。DOP-PCR扩完整基因组的效率不如利用phi29 DNA聚合酶的MDA,但在扩增高度降解的痕量DNA方面具有巨大优势,在法医鉴定领域具有重要应用。本制品就是在DOP-PCR基础上进行优化而开发。

- 专门用于痕量的DNA,方便,含有除模板DNA和引物以外的所有成份,简化了准备工作。
- 优化的引物浓度,使自连序列和非模板相关序列的合成。
- 使用高保真酶,降低突变率。
- 长度在300~1700bp之间,平均500bp左右。
- 模板基因DNA用量一般为10~100pg。
- 所得PCR产物可用于STR多重扩增、比较基因组杂交、单染色体文库构建、基因组图谱研究等。
- 本制品足够50次50μL体系的DOP-PCR。
- 本制品只能用于科研。

| 组分 | 规格 |
| DOP-PCR MagicMix | 750μL |
| DOP-PCR引物(20pmol/μL) | 250μL |
| 超纯水 | 1mL |
保存:-20℃,避免反复冻融,有效期1年。

- 在干净的PCR管中,分别加入下列成分:
成分 阴性对照 样品 DOP-PCR MagicMix 25μL 25μL 基因组DNA模板(自备)
或单个细胞不加 10~100pg
(或单个细胞)DOP-PCR引物(20pmol/μL) 5μL 5μL ddH2O 至50μL 至50μL - 放入PCR仪中按下列参数进行DOP-PCR。
过程 温度 时间 预变性 95℃ 2min 第一轮PCR
(5个循环)94℃ 1min 30℃ 1min 72℃(以每秒升0.3℃的速度升到72℃) 3min 第二轮PCR
(35个循环)94℃ 0.5min 56℃ 0.5min 72℃ 2min - 结束后取5~10μL直接上样电泳(不需要额外再加DNA上样液),红色染料电泳速度相当于50bp DNA片段。DOP-PCR产物的长度一般在300~1700bp之间。
- 所得DOP-PCR产物可以用于后续PCR检测或其他分析。
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