产品货号：
BTN111109
中文名称：
DOP-PCR试剂盒
英文名称：
Degenerate Oligonucleotide Primer Kit
产品规格：
50T
发货周期：
1～3天
产品价格：
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DOP-PCR是扩增全基因组的方法之一，它利用中间含有6个随机碱基的22nt引物，通过两轮PCR（第一轮低温复性，第二轮高温复性）而将模板DNA扩增。DOP-PCR扩完整基因组的效率不如利用phi29 DNA聚合酶的MDA，但在扩增高度降解的痕量DNA方面具有巨大优势，在法医鉴定领域具有重要应用。本制品是DOP-PCR试剂盒的升级版。
- 专门用于高度降解的DNA，方便，含有除模板DNA和引物以外的所有成份，简化了准备工作。
- 模板基因DNA用量一般为10～100pg，最后可以得到1～2μg扩增产物。
- 优化的引物浓度，非特异扩增降低。
- 使用高保真酶，扩增引起的突变率低。
- 长度在1000～5000bp之间，比常规DOP-PCR更长。
- 扩增产物的ADO（Allele Dropout）、基因组涵盖、CNV检测效果，重复性，一致性跟主流WGA方法相当。
- 扩增产物可用于二代测序、STR多重扩增、比较基因组杂交、单染色体文库构建、基因组图谱研究等。
| 组分 | 规格 |
| DOP-PCR缓冲液A | 700μL |
| DOP-PCR缓冲液B | 75μL |
| DOP-PCR专用DNA聚合酶 | 25μL |
| DOP-PCR引物 | 250μL |
| 超纯水 | 1mL |
保存：-20℃，避免反复冻融，有效期1年。
DNA模板、引物、超纯水
- 在一干净的PCR管中，加入下列成分。
成分 阴性对照 样品 DOP-PCR缓冲液A 13.5μL 13.5μL 基因组DNA模板(自备)或单个细胞 不加 10～100pg DOP-PCR缓冲液B 1.5μL 1.5μL DOP-PCR专用DNA聚合酶 0.5μL 0.5μL DOP-PCR引物 5μL 5μL 超纯水 至50μL 至50μL - 放入PCR仪中按下列参数进行DOP-PCR。
过程 温度 时间 预变性 92℃ 2分钟 第一轮PCR
(6个循环)92℃ 1分钟 30℃ 1分钟 按每秒0.3℃的速度升到68℃ 68℃ 3分钟 第二轮PCR
(14个循环)92℃ 30秒 62℃ 30秒 68℃ 3分钟 延伸 68℃ 2分 4℃ Forever - 结束后取5～10μL加上上样缓冲液后进行电泳。DOP-PCR产物的长度一般在1000～5000bp之间。
- 所得DOP-PCR产物经过纯化后可以用于后续PCR检测或其他分析。
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